单单只在PS的时间轴内设置播放一次是不行的，因为保存为Web格式窗口内还有一个选择播放次数的选项，而那个选项默认是永久播放，所以若只需要播放一次，在存储窗口内需要同时设置不只播放一次，具体步骤如下：

所需材料：PSCS6示例。

一、PS软件内打开一个GIF文件，然后点击工具栏“文件”。

二、下拉菜单内点击“存储为Web所用格式”选项。

三、展开循环选项，选择使用“一次”。

四、最后点击存储窗口右下角的“存储”即可只播放一次。