不能。由于云居山其山势陡峭，山路蜿蜒曲折，山路崎岖，路况复杂，因此不能骑自行车上山。云居山风景区内的路段大多为步行道和观景平台，没有专门为自行车设计的道路，自行车上山，可能会影响其他游客的游览体验，也会存在安全风险。