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上下游引物tm值相差太大,怎么选退火温度

2024-09-23 10:19:10

1、退火温度等于4乘(G加C)加2乘(A加T)减(5至8)只是粗算,有时不灵,但比较简便。2、用primer5(oroligo6)计算,引物配对好后,primer5可以显示Tm,我认为这个值就是退火温度,我的经验再加2or3度最好。