细胞壁和细胞膜的屏障，限制修饰系统。1、细胞壁和细胞膜的屏障：野生型微生物的细胞壁和细胞膜会对外源DNA产生屏障作用，阻止进入细胞内部。包括细胞壁的结构、细胞膜的通透性和细胞膜表面的蛋白质等。2、限制修饰系统：野生型微生物细胞内含有限制修饰系统，可以识别降解外源DNA，防止在细胞内进行复制和表达。