脂肪酸β氧化实验中，加入丁酸的作用是生成乙酰-coA。据查询相关信息，丁酸作为β氧化的底物，可以用来生成乙酰-coA的，从而使乙酰辅酶a形成乙酰乙酸、丙酮，用以分析β氧化的特点。