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在细胞培养的过程中避免污染的关键环节有哪些

2024-12-01 01:15:30

为了减少污染对细胞培养的影响,需建立细胞冻存库,分为主细胞库和工作细胞库。当需要进行实验时,从主细胞库中复苏细胞建立工作细胞库。每个冻存标本需详细记录细胞的性质、代数及有无污染。还需建立规范的检测程序进行菌检及细胞鉴定。保证细胞培养系的完整性,必须进行详细的实验记录,内容应涵盖细胞系种类及其来源、有无细菌、病毒、支原体污染、细胞代数和倍增时间、以及选择性突变。作为生物体,培养的细胞会对培养环境中的物理、化学及生物因素作出反应,导致培养细胞生物学特性的改变,从而影响实验结果。污染的时间越长,影响越大。培养环境中,物理、化学及生物因素均可导致污染。由于入侵微生物在培养系中不断增殖、代谢,生物性污染对细胞的危害最大。细胞培养体系的维护至关重要,需定期进行清洁和消毒,确保无污染。使用高质量的培养基和试剂,避免引入外界污染物。细胞培养环境也需严格控制,保持适宜的温度、湿度、光照和二氧化碳浓度。定期更换培养液,及时移除死亡细胞,减少污染风险。细胞来源同样会影响培养过程,应确保细胞来源可靠,避免使用已知携带病原体的细胞系。对于新细胞系,进行严格的检测和鉴定。通过以上措施,可以有效减少污染对细胞培养的影响,确保实验结果的准确性和可靠性。