您是想问冷冻切片的固定步骤吗。1、恒温冰冻切片机为较理想的冰冻切片机，其基本结构是将切片机置于低温密闭室内，故切片时不受外界温度和环境影响，可连续切薄片至5-10μm。2、切片时，低温室内温度以-15℃~-20℃为宜，温度过低组织易破碎，抗卷板的位置及角度要适当，载玻片附贴组织切片，切勿上下移动。3、切好后，室温放置30min后，入4℃丙酮固定5-10min，烘箱干燥20min。PBS洗5min×3。4、进行抗原热修复，微波热修复也可，室温自然冷却。可用3%H2O2孵育5-10min，消除内源性过氧化物酶的活性。